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公司是*专业的ATCC细胞供应商,提供人胃癌细胞;HGC-27培养的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。人胃癌细胞;HGC-27培养 复苏操作要点:
细胞名称 人胃癌细胞;HGC-27培养
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来自未分化胃癌,能分泌黏液素。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3~1:4传代,2~3天1次。
传代情况 C6
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,11;D16S539:10,11;D18S51:16,17;D19S433:14;D21S11:30,33,34;D2S1338:22,24;D3S1358:17,17.3;D5S818:OL,12;D7S820:11,12,13;D8S1179:8.2,10,11,16;FGA:22;TH01:9;TPOX:8;vWA:14;
同工酶
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人胃癌细胞;HGC-27培养 操作步骤:
人胃癌细胞;HGC-27培养 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
20mg芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷Apigenin?-7-O-?glucuronide
20mg5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮5- hydroxy?-6,7-?methoxy flavone?two
20mg5-羟基-7,8-二甲氧基黄酮5- hydroxy?-7,8-?methoxy flavone?two3570-62-5
20mg去氢荷包牡丹碱Dehydrogenation?of bicuculline
20mg去氢吴茱萸碱Dehydroevodiamine67909-49-3
20mg去甲泽拉木醛Demethylzeylasteral
20mg13-去羟基印乌碱13- to the?hydroxy?printing?of Aconitine
20mg七叶胆苷XVIISeven leaf?Dangan?XVII80321-69-3
20mg青霉素酶Penicillinase9001-74-5
20mg七叶皂苷ASeven leaf?saponin A123748-68-5
20mg羟基茜草素Purpurin81-54-9
20mg桤木酮Alder?ketone33457-62-4
20mg乔松素Qiao Songsu480-39-7
20mg千金子甾醇Euphorbiasteroid
20mg氢化原阿片碱Hydrogenation of?protopine128397-41-1
20mg7-羟基-5,8-二甲氧基黄烷酮7- hydroxy?-5,8-?methoxy?flavanone?two54377-24-1
20mg10-羟基攀援山橙碱10- hydroxy?climbing?mountain orange?soda119188-47-5
F007068894-07-5pharmacia17-0719-01羟甲基琼脂糖凝胶FF/CM琼脂糖凝胶FF/CM Sepharose FFBR25毫升2~8℃
pharmacia17-0719-01100毫升
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名称: 羟甲基琼脂糖凝胶FF 25毫升
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,其他中文名称: CM琼脂糖凝胶FF 100毫升
英文名称: CM Sepharose FF
产品规格: 进分
包装:25毫升/100毫升
产品规格: 国产
包装:25毫升/100毫升
级别:BR
Type of exchanger:carboxymethyl;weak anion
Total ionic capacity:0.09-0.13mmol/ml gel
Available capacity:IgG(MW160000):15mg/ml;Bovine COHb(MW69000):30mg/ml;Ribonuclease(MW13700):50mg/ml
Bead structure:Highly cross linked agarose 6%
Mean particle size:90um diameter
Bead size range:45~165um
Max flow rate(XK 16/20):25ml/min
Max linear flow rate:750cm/h
Max operating pressure:0.3Mpa(3 bar 42 psi)
pH working range:6~10
PH stability:long range 4-13 and short range 2-14
Chemical stability:All commonly used aqueous buffers, 1M NaOH;8M guanidine hydrochloride;70% ethanol(tested at 40℃ for 7 days)
Physical stability:Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
凝胶类型:离子交换填料,弱酸型
结构成分:6%交联琼脂糖
粒 径: 45-165μm
配基基团:carboxymethyl(羧甲基)
总离子交换量:0.09-0.13mmol/g凝胶
交换载量:15mg IgG/ml drained medium;30 mg Bovine COHb/ml drained medium;
50mg Ribonuclease/ml drained medium
人胃癌细胞;HGC-27培养工作PH值:6-10
操作温度:4-40℃
性状:含20%乙醇,底部为乳白色胶体。
用途:生化研究。适用于各种带阳性电荷生物大分子的浓缩纯化等
保存:2~8℃
人胃癌细胞;HGC-27培养培养温馨提示:
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