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His标签抗体做western需要考虑哪些

阅读次数:1933 发布时间:2016/12/27 17:53:27

 His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而,目前商品化

His 蛋白三维结构图His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。
 

如何选择合适的His标签抗体?

我们在选择His抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了,His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫荧光IF实验?我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体?

之前有使用SSS(一家著名品牌的His标签抗体,名称隐去)的His标签抗体,一开始还好,过了半年后,就发现产品质量不稳定,做IF实验不行了,后来试用了下Abbkine的,IF结果很漂亮,顺带还买了他们的DyLight荧光二抗 —— 广州南方医科大学一客户

一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl His抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5,000,终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的His抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200,终使用液相当于2ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。

Abbkine His标签抗体
产品名称及描述 品牌 货号 产品详情
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 详情
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 详情
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 详情

 

为什么推荐Abbkine品牌的His抗体?

供应His抗体的进口品牌有很多,包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等,其中Abcam有一款值得推荐的His抗体,品名为6X His tag® antibodyab18184-6X His tag® antibody [HIS.H8] ——Abcam His抗体 [HIS.H8] (货号为:ab18184),该抗体是Abcam推荐的唯一5星级His标签抗体,可用于IF/ICC、IP以及WB实验,截止到2013年,使用该抗体发表在NCBI统计的文章有16篇(详情请点击:6X His tag® antibody [HIS.H8])。该抗体为单克隆抗体,克隆号为HIS.H8,该抗体2013年的中国报价为¥4418/100μl。Abcam的抗体在品牌知名度、质量以及售后方面都是很值得推荐的,然后其价格较高。

在此,我们向您推荐Abbkine的His标签抗体,Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3)(货号A02050),该抗体实际上与上述Abcam抗体来源相同。与Abcam一样,其免疫原是6x His合成多肽,可识别可识别His重组蛋白和在细胞内过表达的His标记重组蛋白。然而其价格比Abcam低65%以上。Abbkine作为美国一家生产型品牌,为多个国际知名品牌提供OEM服务,因此其价格低廉,其质量也经受过市场检验。该抗体可以用于Western Bloting、免疫细胞化学及免疫荧光ICC/IF和免疫沉淀IP实验等多种不同应用。

Abbkine His标签抗体
产品名称及描述 品牌 货号 产品详情
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 详情
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 详情
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 详情
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一个高效价的抗体不仅影响实验结果的灵敏度,还意味着更高的性价比。Abbkine的His标签抗体在常规的WB实验里,推荐的起始稀释比率为1:1000,实际在Abbkine的应用中,还有1:4,000甚至更高的稀释比率,需要根据客户具体的实验条件进行优化。该抗体在免疫细胞化学及免疫荧光ICC/IF中同样表现优秀,5C3克隆的His标签抗体识别的免疫决定簇非常适合ICC/IF的应用。IP免疫沉淀反应也是客户选择Abbkine的一个重要原因。另外,Abbkine还同时提供经HRP偶联的His标签抗体,尤其适合IP-WB验证时去除二抗的干扰;兔源多克隆His抗体也为客户提供另一种His标签的检测方案。

Abbkine还提供大包装1ml的His标签抗体,非常适合经常进行His标签系统免疫学检测的实验需求。为方便客户的使用, 上述产品,Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场,提供全球化的产品质量追踪和售后服务以及保障,如果您在使用过程中有任何问题, 请直接与其当地代理商艾美捷科技有限公司联系。

Abbkine His标签抗体
产品名称及描述 品牌 货号 产品详情
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 详情
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 详情
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 详情

 

美国Abbkine品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌,艾美捷将其引入中国,作为其中国Abbkine His抗体推荐—原装进口单克隆His标签抗体区域代理,将为客户提供具性 价比的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或 区域代理,艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电免费客户专线400-6800-868到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。

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