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技术文章
杆粒提取试剂盒 （Bacmid Extraction Kit）使用说明
点击次数：554 发布时间：2021/1/11 10:54:31
Bacmid Extraction Kit
产品货号：P0123
产品规格：100 次/200 次
产品简介：
杆粒提取试剂盒适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。
产品内容:
| 产 品 名 称 | 100 次 | 200 次 | 储 存 条 件 |
|---|---|---|---|
| Solution 1 | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
| Solution 2 | 30ml | 60ml | 室 温 |
| KAC | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
| End Solution | 4ml | 8ml | 2-8℃ |
操作步骤：
1. 5ml 离心管 12000rpm 离心 1min 收集细胞。
2. 真空吸干上清，0.3ml 的 Solution 1 重悬沉淀，轻轻地震荡或上下混匀。
3. 0.3ml 的 Solution 2 轻轻混匀，室温孵育 5min。注意：悬浮的沉淀应该从浑浊到几乎半透明。
4. 缓慢加入 0.3ml KAC，加入过程中轻轻混匀，冰上放置 5-10min。
5. 12000rpm 离心 10min。
6. 轻轻将上清转移到含有 0.8ml 异丙醇的离心管，不要吸到白色沉淀，颠倒混匀，冰上孵育 5-10min。
7. 室温 12000rpm 离心 15 min。
8. 小心弃去上清，不要浮起沉淀，加入 0.5ml Wash Buffer，颠倒离心管数次清洗沉淀。
9. 室温 12000rpm 离心 5 min。重复 8 和 9。
10. 轻轻吸弃上清，室温 5-10 min 干燥沉淀，不要过分干燥。注意：勿使用真空离心选装蒸发仪去干燥 DNA。
11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀，为避免剪切，勿机械重悬DNA，让溶液顺管子轻轻流下溶解DNA。
注意事项：
1. 不纯化的杆粒 DNA 存在-20℃，因为反复冻融会剪切 DNA。
2. 分析重组杆粒 DNA（PCR 鉴定重组杆粒 DNA）或转染昆虫细胞。
原创作者：上海尚宝生物科技有限公司
